肉的宰后嫩化是指归因于肌原氯纶成分的影响，肌原氯纶成分是由内源性球血清血清质电离酶可光降解肌原氯纶和神经上皮生殖细胞膜系骨架球血清会造成的。与两百多年来一支是特别关注对象的钙球血清酶各种，胱天球血清酶（caspases）这两天已成为感欲望来说题。胱天球血清酶在神经上皮生殖细胞膜系凋亡的履行一阶段起着至关比较重要的影响，里面caspase-3在死去球血清血清质电离中的影响是各个面和麻烦的，以至于不错进几步探究。S-亚硝基化能够控制钙尽情释放、养分消化吸收、球血清质可光降解和神经上皮生殖细胞膜系凋亡来控制口感，是指嫩度和持水特性。之前探究发现S-亚硝基化是可以上涨根据线粒体的caspase-3级联化学反应，这有可能是身体肌肉神经上皮生殖细胞膜系凋亡和羊肉好品质转化的原故。caspase-3的探究重大是其与神经上皮生殖细胞膜系凋亡的有关，但，越来越多有探究研讨S-亚硝基化控制caspase-3的制度化。

2024年9月由合肥占农业的大部分高中张万刚教导拜谱生物在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物学为该研究提供了亚硝基化淡化组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文微信标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊论文：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2026年危害细胞：5.7

说出周期：2024年9月

玩家基层单位：南京农业大学

探讨用料：蛋白

拜谱展示 系统：亚硝基化修饰组学

工艺途径：

一、探析结论

01.Caspase-3特异性

当前尚不清晰NO对caspase-3的缓和反应会不归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样的溶液浓度等度的GSNO是外源性NO生产，以诱导性caspase-3的身体之外S-亚硝基化。报告揭示，与不GSNO的组比起来，100、200和400μM GSNO组的caspase-3渗透性氧明显大大减少（图1），与之前报道怎么写相一致。GSNO处里大大减少caspase-3渗透性氧的潜在性主观原因仍迫切需要揭示。

图1 不一浓度值的GSNO正确处理对caspase-3抗逆性的反应

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化层面

调查Caspase-3的亚硝基化成度，以揭示GSNO对Caspase-3的反响性。经GSNO办理后，在线检侧到caspase-3球蛋白S-亚硝基化承载力提高（图2）。这类导致表达，外源性GSNO激发可实现目标引诱caspase-3的离体S-亚硝基化。使人惊诧的是，在找不到GSNO留存的剖析组中在线检侧到这个变弱的S-亚硝基化带，这表达caspase-3能够造成内源性的S-亚硝基化。与此同时，本调查中caspase-3的S-亚硝基化成度较高，而caspase-3的活力较低，这与刚刚的调查同步。而是，caspase-3的特女性朋友S-亚硝基化装饰位点尚不看不清楚，还须得进每一步的研究。

图2 GSNO治理 对caspase-3S-亚硝基化水准的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。白色标签的队列表现S-亚硝基化肽，色标签的C表现S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3可降解结蛋清

结淀粉酶是种为首要的癌上皮细胞骨架淀粉酶，在能维持肌癌上皮细胞空间形式的空间形式其中，完正详细性性和缩紧性问题起着为首要用，设计S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶光溶解的过敏性享有为首要价值。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的初始状态肌植物纤维棉淀粉酶）组好于，0 μM GSNO组（肌原植物纤维棉和caspase-3的孵育，无GSNO）的其中，完正详细性结淀粉酶水分份量不错变低，建议caspase-3对结淀粉酶享有存在的淀粉酶水解反应效果。在GSNO孵育后，其中，完正详细性结淀粉酶的水分份量明显的延长（P < 0.05）。除此以外，当GSNO渗透压增高时，其中，完正详细性结淀粉酶的水分份量持续时间调整（P < 0.05）（图5）。这种看见得出结论，SNO呈现的caspase-3以标准信任的方式减缓结淀粉酶的光溶解。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结淀粉酶

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙球蛋白-T

肌钙蛋清质-T (TnT)是原肌球蛋清质调接担负健身肌肉收宿的细条的有必须肌原人造合成人造纤维蛋清质。TnT的溶解塑料特证是的检测工具到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化原因下，caspase-3对TnT的溶解塑料原因如图甲随时6随时，与Std组（只含caspase-3和GSNO的肌原人造合成人造纤维）比起来，caspase-3组中30 kDa TnT精彩场面描写同质性提高，看到caspase-3体验了TnT的溶解塑料，还有，caspase-3与GSNO的孵育致使30 kDa TnT走低。在100和200 μM GSNO组相互间也没有的检测工具到比较突出的差异性(P > 0.05)，而当GSNO的质量浓度到400 μM 时，该精彩场面描写同质性下降(P < 0.05)。以下看到看到了SNO遮盖的caspase-3对TnT溶解塑料的限制作而成用。结蛋清质和TnT是caspase-3的铭感底物，而GSNO加工变低caspase-3的活性酶类酶类可以致使肌原人造合成人造纤维蛋清质溶解塑料方面变低。综合上面的阐明，NO引导的S-亚硝基化可以实现遮盖半胱氨酸残基来调接caspase-3的活性酶类酶类，故而进一个步骤应响其对结蛋清质和TnT的蛋清质油脂水解效果，故而应响鸡肉品行。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙核蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本实验契机探究S-亚硝基化对caspase-3掩盖的作用力还有其马上又对牛羊肉肌原植物合成纤维离体降解塑料的作用力。淀粉酶S-亚硝基化都可以掩盖caspase-3的半胱氨酸残基，可以引起caspase-3几丁质酶较低，进每一步能够抑制了其对牛羊肉肌原植物合成纤维淀粉酶的淀粉酶水解反应性能。

三、拜谱工作小结

设计主要包括了酶活深入分析，亚硝基化呈现组学深入分析，WB等测量的方法，遇到球蛋清S-亚硝基化能能呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这使得了caspase-3抗逆性的大大减少，齐头并进一大步克制了其对羊肉肌原纤维棉球蛋清的球蛋清溶解力量。本设计为表示球蛋清质亚硝基化对色泽的管控缘由带来了打了个个新的视觉。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球营养物质组学、遮盖球营养物质组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列拜谱生物企业产品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total腐蚀备份、存在巯基，欢迎大家咨询！

决定性论文文献：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663